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心血管标志物汇总及各种标志物解析(四)





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三、心血管标志物解析

3.3心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP/FABP3)

心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP/FABP3),是心脏中的一种新型小胞质蛋白,是心脏最丰富的蛋白质之一,约占心肌细胞可溶性蛋白总量4%-8%。在发生急性心肌梗死(AMI)后,H-FABP比肌钙蛋白I更快速地从心肌细胞中释放,H-FABP可以早在胸痛发作后1-3小时在血液中被发现,6-8小时达到峰值然后在12-24小时内恢复正常,在早期AMI诊断中具有较高的敏感性和良好的特异性。H-FABP相对于MYO具有高度的心肌特异性,其心肌特异性是肌红蛋白的15-20倍,此外,H-FABP的正常血清/血浆值比肌红蛋白低,从而降低假阳性比率,因此,H-FABP取代MYO作为心肌梗死早期诊断理想的标志物,将成为趋势。

除用于AMI早期诊断外, H-FABP被用作监测心脏手术后心肌梗死和再灌注后心肌损伤程度。H-FABP浓度在ACS长期预后中,可有效鉴别出AMI、心衰及不稳定心绞痛等不良事件的高危患者;H-FABP与肌钙蛋白联合检测可提高诊断敏感性,对ACS更具诊断价值。

 

人H-FABP单克隆抗体

科赛格最新推出一批高质量的抗人H-FABP单克隆抗体,能够用于多平台的免疫检测。利用我企业化学发光检测平台对自产H-FABP抗体进行系统评价,检测范围约为0.3-250 ng/mL,将所推荐的抗体对经过大量的血清样本测试,具有良好临床检测性能。

校准曲线

筛选出的单克隆抗体分别用作捕获抗体或标记抗体,组合成不同抗体组合,用于双抗夹心法免疫检测。不同抗体对分别检测0、10、25、50、125和250 ng/mL的H-FABP进行定量检测,最后选择出最好的配对方式如下(捕获抗体-标记抗体):

CSB-DA006AmN②-CSB-DA006AmN①

图1. H-FABP检测的校准曲线(化学发光法)

 

精密度

利用我企业的化学发光平台对不同批次的抗体进行精密度分析,通过多次反复检测低值和高值质控品,计算出变异系数(CV)均<5%,见下表:

回收率

通过回收试验分析抗体在化学发光平台检测的准确度,平均回收率102.1%,由此可见准确度较高。

 

临床比对

为验证抗体适用于临床检测,在化学发光平台利用自制抗体对CSB-DA006AmN②-CSB-DA006AmN①对23例血清进行检测,检测结果和比对试剂检测值相关性0.97,能够满足临床检测需求。

图2. 科赛格H-FABP抗体用于化学平台检测血清样本

稳定性

将CSB-DA006AmN①和CSB-DA006AmN②两种H-FABP单克隆抗体(未添加保护剂)置于-20°C、4°C和37°C存放,在0、3、6和第10天测三种温度下的抗体效价,以-20°C作为对照组,将4°C和37°C与之对比,效价变化不超过10%,证明稳定性良好。

   图3. 不同温度对H-FABP抗体稳定性影响

H-FABP蛋白

科赛格同时还提供高质量的H-FABP蛋白,货号为CSB-DP006A。该蛋白以液体形式供应,可用于免疫测试的校准品、免疫印迹(WB)等方面。

 

参考文献

1. anaka T, Hirota Y, Sohmiya K, Nishimura S, Kawamura K (Apr 1991). "Serum and urinary human heart fatty acid-binding protein in acute myocardial infarction". Clinical Biochemistry. 24 (2): 195–201.

2. Watanabe K, Wakabayashi H, Veerkamp JH, Ono T, Suzuki T (May 1993). "Immunohistochemical distribution of heart-type fatty acid-binding protein immunoreactivity in normal human tissues and in acute myocardial infarct". The Journal of Pathology. 170 (1): 59–65.

3. Glatz JF, van Bilsen M, Paulussen RJ, Veerkamp JH, van der Vusse GJ, Reneman RS (Jul 1988). "Release of fatty acid-binding protein from isolated rat heart subjected to ischemia and reperfusion or to the calcium paradox". Biochimica et Biophysica Acta. 961 (1): 148–52.

4. McCann CJ, Glover BM, Menown IB, Moore MJ, McEneny J, Owens CG, Smith B, Sharpe PC, Young IS, Adgey JA (Dec 2008). "Novel biomarkers in early diagnosis of acute myocardial infarction compared with cardiac troponin T". European Heart Journal. 29 (23): 2843–50.

5. Kilcullen N, Viswanathan K, Das R, Morrell C, Farrin A, Barth JH, Hall AS (Nov 2007). "Heart-type fatty acid-binding protein predicts long-term mortality after acute coronary syndrome and identifies high-risk patients across the range of troponin values". Journal of the American College of Cardiology. 50 (21): 2061–7.

















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