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浅谈蛋白纯化的首选标签:His标签(His-Tag)





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His标签.jpg
 

His标签(His-Tag)是由 6-10 个连续的组氨酸残基组成,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
 

6×His(His6)标签序列如下:

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His标签是目前原核表达最常用的标签,也是蛋白纯化的首选标签,主要原因如下:
 

1. His标签与细菌的转录翻译机制兼容,有利于蛋白表达;

2. 
His标签分子量非常小,只有0.84KD,一般不会影响目标蛋白的功能;

3. 
His标签非常小,不会改变目的蛋白自身的可溶性,相反一些大的标签如MBP,可大大提高融合蛋白的可溶性,尽管目的蛋白本身是不可溶或者折叠不正确;

4. His标签对目的蛋白本身特性几乎没有影响,而不像GST标签那样容易形成二聚体,从而影响蛋白的特性;

5. His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体;

6. 可应用于多种蛋白表达系统,可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签表达;

7. 采用固定化金属离子亲和层析纯化His-Tag融合蛋白操作简便,纯化的条件温和,对蛋白的影响较小;

8. 蛋白纯化完之后可以不需切除此标签,也不会对蛋白产生功能影响。


带His标签蛋白的纯化利器
 
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